1.基本檢查:是確定精液變量穩(wěn)定的常規(guī)方法,不僅是男科實驗室,任何開展精液檢查的實驗室都能遵循。精子計數(shù)依然推薦使用改良Neubauer血細胞計數(shù)板的方法,但計數(shù)的方法有了改變。明確推薦了伊紅笨胺黑染色法作為精子存活率診斷的優(yōu)先方法,伊紅染色和低滲腫脹實驗只作為備選方法。刪減了參考值下限的描述。對于精子活動率大于40%的樣本沒有必要做存活率評估。與第5版手冊中淡粉色判讀為活精子不同,明確了只有精子頭為白色的精子為活精子、淡粉色為死精子。臨床數(shù)據(jù)表明,鑒別快速前向運動精子非常重要。因此,關于精子活力分級,第6版手冊建議恢復到快速前向運動、慢速前向運動、非前向運動和不活動4個活力級別,但精子活動率的參考值范圍卻依然是按前向運動(PR)、非前向運動(NP)、不活動(IM)3個活力級別計算。第6版手冊強調,精子形態(tài)學評估的價值不僅在于其可用于判斷自然妊娠和輔助生殖技術(ART)結局的預后,還可以為男性生殖***包括睪丸和附睪功能判斷提供更多診斷信息。對于3%和5%的精子“正常”形態(tài)率的判斷,則要求必須由訓練有素的人員評估1500個精子來完成;對于無尾精子(只有頭部的精子)超過總精子數(shù)20%的精液,應單獨計算并在報告中注明;所有操作人員都應接受規(guī)范的CASA分析儀使用培訓,嚴格按照使用指南進行操作?。美國精子分析高準確率
男科實驗室中通常所指的質量包含三個方面:實驗室內部質量、醫(yī)生處置的質量以及結果的質量[3]。1.實驗室內部質量與**分析有關的實驗室內部質量主要是工作人員的素質和所采用儀器的質量。工作人員應經(jīng)過特殊的培訓?儀器必須處于正常狀態(tài)、確保準確的結果?操作應符合規(guī)程[4]。CASA系統(tǒng)本身的質量難于評定。硬件?如顯微鏡、影像攝影機和計算機經(jīng)檢查便可確定其可靠性。但軟件并非如此?軟件中存在不確定的因素?算法是軟件中**重要的部分?通常制造者保守這些秘密;因此?有關軟件的數(shù)學上、信息性的、統(tǒng)計學的或生物測量方面的檢查實驗室難于進行。南京兔子精子分析高準確率CASA系統(tǒng)用量少,檢測速度快,能夠顯著提高實驗室的工作效率。
通過結果的生物學意義對結果質量進行評估?當所有具生物學意義的參數(shù)在測試中表現(xiàn)出較小的可變性時則方法學可變性亦較低方法學可變性低則結果質量就高。CASA系統(tǒng)獲得的數(shù)值與直觀評估獲得的數(shù)值進行分析和比較在精子數(shù)量和綜合運動性上具有較好的相關性而·131·中國優(yōu)生與遺傳雜志2002第10卷第6期DOI:10.13404/j.cnki.cjbhh.2002.06.091在前向運動精子百分率上的相關性較低]。Holt等報道了在常規(guī)實驗條件下采用五種不同的CASA系統(tǒng)對**參數(shù)值進行比較,其結果為:采用同一個測定池由不同的操作者測定**參數(shù);變異系數(shù)(CV)是29%?活動精子比率的CV為24%?平均路徑速度(VAP)的CV為43?85%。作者們指出該分析結果不應看作是不同CASA系統(tǒng)間的工作情況的比較?實際上它揭示了操作者的錯誤是差異的主要來源。目前有待于尋找進一步的標準來評估CASA變量的結果質量。精子***的生物學功能是使卵細胞授精?因此用夫婦中的授精結果來考察精子運動性是合理的?只有在該基礎上能夠確定活動性參數(shù)的重要性。輔助生殖技術(授精IVF)的發(fā)展使檢測精子質量與各參數(shù)間的關系的比較成為可能;同樣可以驗證CASA測定結果與精子真實質量間的相關性有利于CASA結果質量的提高。
精子動力分析儀在各物種精子檢測方面具有明顯重要作用。它具有高度的客觀性,該儀器通過相差的圖像分析技術和算法,對精子的運動參數(shù)進行精確測定,避免了人工觀察和評估時可能出現(xiàn)的主觀偏差,結果更加準確可靠。其次,檢測參數(shù)豐富。它不僅能提供精子活力、濃度等基本信息,還能詳細分析精子的運動軌跡、速度變化、擺動頻率等多種參數(shù),從多個維度評估精子質量,為實驗提供更完善的依據(jù)。儀器可處理大量精子樣本,在短時間內生成詳細的檢測報告,提高了檢測效率。其操作相對簡便,操作人員可以盡快掌握操作方式,經(jīng)過一定培訓后即可熟練操作,有利于在不同領域里廣泛應用。IVOS和CEROS集成了智能化的分析軟件,能夠自動識別和計算精子的各項參數(shù),減少了人工操作的誤差。
五、精子活動力檢測[正常參考值]**后30-60分鐘活動力為Ⅲ級以上的精子>0.80:**后120分鐘內活動力為Ⅲ級以上的精子>0.60;**120分鐘后0.25-0.60的精子仍能活動。[臨床意義]活動不良或不活動的精子增多,是導致不育的重要原因之一。常見于精索靜脈曲張、泌尿生殖系的非特異性***如大腸桿菌***,某些代謝藥、抗瘧藥、雌***、氧化氮芥等,也可使精子活動力下降。六、精子計數(shù)[正常參考值](100-150)×109/L或一次排精總數(shù)為(4-6)×108。[臨床意義]1.精子計數(shù)小于20×109/L或一次排精總數(shù)少于1×108為不正常,見于精索靜脈曲張、鉛金屬等有害工業(yè)污染、大劑量放射線及某些藥物影響。2.精液多次未查到精子為無精癥,主要見于睪丸生精功能低下,先天性輸精管、精囊缺陷或輸精管阻塞。輸精管結扎術2個月后精液中應無精子,否則說明手術失敗。3.老年人從50歲開始精子數(shù)減少以至逐步消失。通過計算機圖像處理功能對顯微鏡下放大的精子圖像進行識別和跟蹤計算,從而得出精子動靜態(tài)各項參數(shù)。上海魚精子分析DSL
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精液顯微鏡檢查精子計數(shù):正常人精子計數(shù)為0.6×1012~1.5×0.012/L,相當于一次排出的精子總數(shù)為400×106~600×106。當精子計數(shù)值<20×106/ml或一次排精總數(shù)<100×106為精子減少,超過致孕極限而導致不育。精液直接涂片或離心沉淀后均未查到精子為無精癥。見于先天性睪丸發(fā)育不全、畸形或后天睪丸損傷和萎縮(如睪丸結核、炎癥、淋病、垂體或腎上腺功能異常的內分泌性疾病等)、輸精管阻塞或是先天性輸精管及精囊缺陷,是導致少精或無精的重要原因,也是導致不育的重要原因。檢查有無精子也是檢查輸精管結扎術的效果觀察。結扎六周后,連續(xù)檢查無精子,說明手術成功,如果結扎兩個月后,精液中仍有精子,說明手術不成功。美國精子分析高準確率