培養(yǎng)基制備的基本方法和注意事項:1.培養(yǎng)基成分的稱取培養(yǎng)基的各種成分必須精確稱取并要注意防止錯亂.較好一次完成,不要中斷??蓪⑴浞街糜诎鴤?,每稱完一種成分即在配方上做出記號,并將所需稱取的藥品一次取齊,置于左側,每種稱取完畢后,即移放于右側。完全稱取完畢后.還應進行一次檢查。2.培養(yǎng)基各成份的混合和溶化培養(yǎng)基所用化學藥品均應是化學純的。使用的蒸煮鍋不得為銅鍋或鐵鍋,以防有微量銅或鐵混入培養(yǎng)基中,使細菌不易生長。較好使用不銹鋼鍋加熱溶化.也可放入大燒杯或大燒瓶中置高壓蒸汽滅菌器或流動蒸汽消毒器中蒸煮溶化。在鍋中溶化時、可先用溫水加熱并隨時擾動,以防焦化、如發(fā)現(xiàn)有焦化現(xiàn)象、該培養(yǎng)基即不能使用,應重新制備。全自動滅菌程序可快速完成高溫高壓滅菌流程。湖北培養(yǎng)基制備器定制
種子培養(yǎng)基:種子培養(yǎng)基是供孢子發(fā)芽、生長和大量繁殖菌絲體,并使菌體長得粗壯,成為活力強的“種子”。所以種子培養(yǎng)基的營養(yǎng)成分要求比較豐富和完全,氮源和維生素的含量也要高些,但總濃度以略稀薄為好,這樣可達到較高的溶解氧,供大量菌體生長繁殖。種子培養(yǎng)基的成分要考慮在微生物代謝過程中能維持穩(wěn)定的pH,其組成還要根據(jù)不同菌種的生理特征而定。一般種子培養(yǎng)基都用營養(yǎng)豐富而完全的天然有機氮源,因為有些氨基酸能刺激孢子發(fā)芽。但無機氮源容易利用,有利于菌體迅速生長,所以在種子培養(yǎng)基中常包括有機及無機氮源。較后一級的種子培養(yǎng)基的成分好好能較接近發(fā)酵培養(yǎng)基,這樣可使種子進入發(fā)酵培養(yǎng)基后能迅速適應,快速生長。湖北培養(yǎng)基制備器定制設備運行噪音低于行業(yè)標準,優(yōu)化實驗室環(huán)境。 在環(huán)境監(jiān)測領域支持微生物檢測培養(yǎng)基快速制備。
簡單制作培養(yǎng)基,需調整培養(yǎng)基成分,介質中使用的化學物質應該是化學純品,銅鍋或鐵鍋易導致銅、鐵混入培養(yǎng)基,使細菌難以繁殖。用不銹鋼鍋加熱溶解較為適宜。溶解于水的鍋子,可用溫水加熱,隨時攪拌,防止結焦。若發(fā)現(xiàn)結焦,則不能使用介質,需重新調配。在溶解大多數(shù)固體成分之后,用少量熱將其全部溶解,直到沸騰。簡單制作培養(yǎng)基,需調整培養(yǎng)基的pH值,由于加熱消毒過程中培養(yǎng)基的pH值會發(fā)生變化,因此應在培養(yǎng)基組分完全溶解后,調整pH值。舉例來說,牛肉汁的pH值下降了0.2左右,而腸浸出物的pH值則明顯上升。所以,在這一步中,操作者要注重不斷探索經驗,掌握培養(yǎng)基的很終pH值,保證培養(yǎng)基的質量。在調整pH值后,要將其煮沸幾分鐘,以利于培養(yǎng)基沉淀。
購買的培養(yǎng)基到貨后,應有專人做好接受和驗收工作,應仔細核對生產企業(yè)提供的資料、培養(yǎng)基名稱、規(guī)格數(shù)量、外觀特征、批號、保質期是否符合要求。每批培養(yǎng)基到貨后都應對培養(yǎng)基的質量進行檢測,滿足檢測方法規(guī)定的要求后方可投入使用。培養(yǎng)基的儲存:干粉培養(yǎng)基應保存在陰涼干燥處,要避免陽光直射;未開瓶的培養(yǎng)基在室溫下的保存期限以廠家提供為準,開瓶后的干粉培養(yǎng)基易吸濕,應注意防潮并盡快用完。應定期對儲存中的培養(yǎng)基進行常規(guī)檢查,如容器密閉性復查、開封日期、內容物的感官檢查,如果培養(yǎng)基發(fā)生結塊、顏色異常和其他變質跡象就不能再使用。培養(yǎng)基制備器功能強大的加熱器,能夠迅速加熱!
培養(yǎng)基的實驗室制備:1.過濾滅菌:過濾滅菌可以在真空負壓或正壓條件下進行。使用無菌設備和0.2um孔徑的濾膜。將過濾裝置的各個部分消毒滅菌,或使用預消毒設備。一些濾膜上附著蛋白質或其他物質()。為達到有效過濾,應事先將濾膜用無菌水潤濕。2.監(jiān)測:應對經濕熱或過濾滅菌的培養(yǎng)基進行監(jiān)測,尤其要對pH、色澤、滅菌效果和均勻度等指標進行監(jiān)測。添加劑的制備:制備含有有毒物質(生素)時應小心操作,避免因粉末的擴散造成實驗人員過敏或發(fā)生其他不良反應。采用適當?shù)念A防措施并小心按照產品使用說明操作。投資一臺高性能制備器可明顯降低實驗失敗率,長期節(jié)省時間和成本。湖北培養(yǎng)基制備器定制
全自動培養(yǎng)基制備儀主要特點:具有快速升溫和迅速冷卻功能!湖北培養(yǎng)基制備器定制
培養(yǎng)基的滅菌:一般培養(yǎng)基可采用121℃高壓蒸汽滅菌15分鐘的方法。在各種培養(yǎng)基制備方法中,如無特殊規(guī)定,即可用此法滅菌。某些畏熱成分,如糖類,應另行配成20%如或更高的濃液,以過濾或間歇滅菌法消毒,以后再用無菌操作技術、定量加于培養(yǎng)基。明膠培養(yǎng)基亦應用較低溫度滅菌。血液、體液和物品等則應從無菌操作技術抽取和加入于經冷卻約50℃左右的培養(yǎng)基中。瓊脂斜面培養(yǎng)基應在滅菌后立即取出、待冷至55-60℃時,擺置成適當斜面、待其自然凝固。湖北培養(yǎng)基制備器定制