HE染色常見(jiàn)問(wèn)題：切片染色不均勻，有片狀的弱著**存在答：（1）取材時(shí)組織太厚，固定過(guò)久，導(dǎo)致深部組織固定不佳，而表淺組織過(guò)度固定，而透明、脫水、浸蠟均是如此，這樣在后期染色時(shí)就會(huì)出現(xiàn)染色不均勻。應(yīng)該將厚的組織剖開(kāi)固定。（2）制片過(guò)程有問(wèn)題，切片厚薄不一，或者有刀痕，或組織與玻片間存在氣泡。同一張切片厚薄不一，一般都是在制片時(shí)，刀片固定不佳或刀片鈍或刀片與組織角度不佳（一般比較好角度為5°）（3）脫蠟前未烘烤，脫蠟時(shí)間過(guò)短或脫蠟液使用過(guò)久，導(dǎo)致脫蠟不徹底。（4）染色液過(guò)少，著色不均勻；或染色時(shí)部分組織干涸而另一部分濕潤(rùn)，這樣會(huì)導(dǎo)致組織吸附染料的能力不一。（5）分化不當(dāng)。南京英瀚斯，專(zhuān)業(yè)的病理染色實(shí)驗(yàn)服務(wù)平臺(tái)。南京英瀚斯，專(zhuān)業(yè)的技術(shù)提供專(zhuān)業(yè)的HE染色服務(wù)。安徽值得信賴(lài)的HE染色分析

HE染色伊紅溶液中加入少量的冰醋酸(一般小于10%就行)，可改變組織等電點(diǎn)，促進(jìn)伊紅與胞漿蛋白質(zhì)結(jié)合，其本身不參與染色的反應(yīng)。當(dāng)蘇木素染色效能極高，很短時(shí)間就導(dǎo)致核漿共染時(shí)，可適當(dāng)?shù)靥砑颖姿?一般不超過(guò)2%)，抑制蘇木素染色效能，方便控制染色時(shí)間，同時(shí)也能提高蘇木素染色的清晰度。現(xiàn)在有商用的HE染色液賣(mài)，但是質(zhì)量參差不齊。如果課題組較大，完全可以自己配制，效果也挺好。配制為乙酸濃度5%-7.5%和鹽酸濃度為0.5%-1%的蘇木素溶液放置一周，即可完全成熟，染色效果好，氧化膜和結(jié)晶都很少(一般蘇木素中酸度越低越容易產(chǎn)生氧化膜和結(jié)晶，這也是提示更換蘇木素的標(biāo)志之一)。甘肅專(zhuān)業(yè)的HE染色分析常用HE染色試劑配制方法。

HE染色原理：一、細(xì)胞核染色原理：蘇木精為堿性天然染料，可使細(xì)胞核著色。細(xì)胞核內(nèi)染色質(zhì)的成分主要是DNA，在DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu)中，兩條核苷酸鏈上的磷酸基向外。使DNA雙螺旋的外側(cè)帶負(fù)電荷，呈酸性，很容易與帶正電荷的蘇木精堿性燃料以離子鍵或氫鍵結(jié)合而被染色。蘇木精在堿性溶液中呈藍(lán)色，所以細(xì)胞核被染成藍(lán)色。二、細(xì)胞漿染色原理：細(xì)胞漿內(nèi)主要成分是蛋白質(zhì)，為兩性化合物、細(xì)胞漿的染色與pH值有密切關(guān)系，當(dāng)pH調(diào)到蛋白質(zhì)等電點(diǎn)4.7-5.0時(shí)，胞漿對(duì)外不顯電性，此時(shí)酸或堿性染料不易染色。當(dāng)pH調(diào)到6.7-6.8時(shí)，大于蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)pH值，表現(xiàn)酸性電離，而帶負(fù)電荷的陰離子，可被帶正電荷的染料染色，現(xiàn)時(shí)胞核也被染色，核和胞漿難以區(qū)分。因此必須把pH調(diào)至胞漿等電點(diǎn)以下，在染液中加入醋酸使胞漿帶正電荷（陽(yáng)離子），就可被帶負(fù)電荷（陰離子）的染料染色。伊紅Y是一種化學(xué)合成的酸性染料，在水中離解成帶負(fù)電荷的陰離子，與蛋白質(zhì)的氨基正電荷（陽(yáng)離子）結(jié)合而使細(xì)胞漿染色，細(xì)胞漿、紅細(xì)胞、肌肉、結(jié)締組織，嗜伊紅顆料等被***成不同程度的紅色或粉紅色，與藍(lán)色的細(xì)胞核形成鮮明的對(duì)比

HE染色多聚甲醛保存組織的注意事項(xiàng)：多聚甲醛放置過(guò)久其中的醛基可能會(huì)被氧化為酸，使溶液pH降低，從而影響染色。不同細(xì)胞或組織樣品所需的固定時(shí)間有所不同，應(yīng)當(dāng)根據(jù)細(xì)胞或組織的種類(lèi)以及組織塊的大小來(lái)調(diào)整固定時(shí)間。多聚甲醛雖然作用溫和，但能硬化組織，固定時(shí)間過(guò)久會(huì)導(dǎo)致組織變脆，切片時(shí)易碎。因此固定時(shí)間通常不宜超過(guò)24小時(shí)。多聚甲醛可長(zhǎng)期存在于固定過(guò)的細(xì)胞或組織樣品中，固定完成后用適當(dāng)?shù)南礈煲夯蛩疀_洗數(shù)小時(shí)仍會(huì)有殘留，因此后續(xù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果如果受醛基影響，須盡量洗去殘留的多聚甲醛。醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基，使抗原決定簇的三維構(gòu)象出現(xiàn)空間障礙。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)可能部分或完全掩蓋某些抗原決定簇，使之不能充分暴露，可造成假陰性的染色，影響免疫組化結(jié)果。因此，4%多聚甲醛固定的細(xì)胞或組織樣品在進(jìn)行免疫組化檢測(cè)時(shí)，有時(shí)需要對(duì)抗原先進(jìn)行修復(fù)，然后才能進(jìn)行免疫染色等后續(xù)操作。骨組織HE染色的操作流程。

HE染色病理技術(shù)中**常用的一種方法，通過(guò)它可以做出病理診斷和發(fā)現(xiàn)尋求別的輔助方法，以達(dá)到準(zhǔn)確，完整的病理診斷。一、染色目的 病理學(xué)的所有切片，都必須通過(guò)一種以上的染料，通過(guò)各種不同的方法，將切片中各種不同的物質(zhì)，在不同染液的作用下，將其顯示出來(lái)，使之在光學(xué)顯微鏡下，能夠完全的觀看各種結(jié)構(gòu)。例如，HE染色，好質(zhì)量的切片可以清晰地顯示出多不同的結(jié)構(gòu)，細(xì)胞核著藍(lán)黑色，細(xì)胞漿著粉紅色，軟骨著藍(lán)色等。清晰的結(jié)構(gòu)為診斷提供的依據(jù)，因此，染色技術(shù)也是病理技術(shù)中的重要組成部分，必須不斷地總結(jié)，方能提高。HE染色，一站式實(shí)驗(yàn)外包服務(wù)平臺(tái)。貴州靠譜的HE染色公司

HE染色，即是蘇木精-伊紅染色法，是形態(tài)學(xué)比較常用的染色方法。安徽值得信賴(lài)的HE染色分析

HE染色注意事項(xiàng)：1、染色時(shí)調(diào)節(jié)pH值很重要。如果組織塊在福爾馬林中固定時(shí)間長(zhǎng)，組織酸化而影響細(xì)胞核著色。因此，要在自來(lái)水中沖洗時(shí)間長(zhǎng)一些或在飽和碳酸鋰水溶液中處理10-30min，這樣可以使細(xì)胞核著色較深。染伊紅時(shí)胞漿著色不佳，可在伊紅溶液中滴加1-2滴冰醋酸。2、切片染蘇木精后，分色這一步是關(guān)鍵，應(yīng)在顯微鏡下控制進(jìn)行，一般以細(xì)胞核染色清楚（晰）而細(xì)胞質(zhì)基本無(wú)色為佳。如果過(guò)分延長(zhǎng)分色時(shí)間將導(dǎo)致染色太淺，應(yīng)重新染色后再行分色。3、切片經(jīng)酒精脫水后，入二甲苯時(shí)可出現(xiàn)白色不透明狀態(tài)，此為脫水不徹底，應(yīng)將切片退回?zé)o水酒精，更換酒精、二甲苯，以求徹底脫水與透明。4、在染色過(guò)程中不要讓切片干燥，以免切片收縮、變形，影響神經(jīng)元形態(tài)。5、切片從二甲苯取出或進(jìn)入二甲苯前，切片周邊均應(yīng)擦干凈或吸干多余水分。6、***封固時(shí)，要用中性樹(shù)脂，防止日后褪色，蓋片要選大于組織塊的面積，如漏出一部分不久將會(huì)褪色，所用樹(shù)脂濃度要適當(dāng)，樹(shù)脂封固時(shí)不能有氣泡。安徽值得信賴(lài)的HE染色分析